* Доктор Джон Майкл Дориан (англ. Dr. John Dorian, или просто «Джей Ди» (JD), актёр — Зак Брафф) — молодой врач, к началу сериала только что закончивший медицинский колледж и пришедший в клинику «Sacred Heart» как стажер. По ходу развития сюжета становится штатным врачом, старшим лечащим врачом. От его лица ведётся повествование.
* Доктор Кристофер Дункан Тёрк (англ. Dr. Christopher Duncan Turk, актёр Дональд Фэйсон) — хирург (в конце восьмого сезона — глава хирургии), лучший друг Джона Дориана, с которым они вместе учились в медицинской школе, жили в одной комнате во время учёбы в колледже и попали на работу в одну и ту же клинику.
* Доктор Эллиот Рид (англ. Elliot Reid, актриса Сара Чок) — ещё один молодой врач. Она знакомится с Тёрком и Джей Ди в их первый рабочий день. Очень скоро они становятся друзьями. Кроме того, у Эллиот и Джей Ди вскоре после начала сериала возникают романтические отношения, которые так или иначе напоминают о себе на протяжении всего сериала, составляя одну из его «любовных линий».
* Карла Эспиноса (англ. Carla Espinosa, актриса Джуди Рейес) — старшая медицинская сестра клиники, имеющая большой опыт работы и любящая давать советы окружающим. Она помогает Джей Ди, Тёрку и Эллиот освоиться на новом месте, и вскоре они становятся друзьями. В конце третьего сезона Карла и Тёрк женятся, а позже у них рождается ребёнок. На их примере в сериале раскрываются трудности типичной молодой пары, а позже — семьи.
* Доктор Персиваль Кокс (англ. Dr. Percival Elisey Cox, «Пэрри». Актёр Джон МакГинли) — один из самых опытных врачей в клинике, позже — глава ординатуры, а после ухода Келсо — главный врач. Несмотря на сложный характер, из-за которого его недолюбливает вся клиника, Кокс периодически помогает Джей Ди, Тёрку и Элиот выходить из сложных ситуаций. Джон Дориан считает его своим наставником, а себя — его протеже.
* Доктор Роберт Келсо (англ. Dr. Robert "Bob" Kelso, «Боб». Актёр Кен Дженкинс) — главный врач клиники, постоянно конфликтующий с Коксом. Мало популярен среди сотрудников из-за своего отношения к ним, однако в глубине души добр. Очень опытный врач.
* Уборщик (актёр Нил Флинн) — единственный главный герой, не имеющий отношения к медицине, но, тем не менее, периодически влияющий на развитие сюжета. Никто из героев не знает настоящего имени персонажа. Уборщик называет своё имя (Глен Мэтьюс) Джону Дориану в последней серии восьмого сезона, однако неизвестно, соврал он при этом или нет. После разговора Уборщика и Джона Дориана, мимо Уборщика проходит медбрат, который называет его Tony. Некоторые фанаты полагают, что Уборщика зовут Том. Это связано с тем, что в эпизоде 5x11 - My Buddy's Booty один из его приятелей говорит ему: "Nice one, Tom!", когда Уборщик издевается над Доктором Коксом. При более внимательном просмотре этого момента можно убедиться в том, что на самом деле эта фраза звучит как "Nice, you tell'em!", что было переведено каналом MTV как "Молодец, старик, так его!".
* Роберт Масчио — Доктор Тодд Куинлэн (англ. Dr. Todd Quinlan) — хирург (1-8 сезоны, 118 серий);
* Сэм Ллойд — Теодор «Тэд» Баклэнд (англ. Theodore «Ted» Buckland) — юрист клиники (1-8 сезоны, 93 серии);
* Алома Райт — Лаверн Робертс/Сестра Ширли (англ. Laverne Roberts) — медсестра (1-6, 8 сезоны в роли Лаверн, 6-7 сезоны в роли Ширли; 92 серии);
* Криста Миллер — Джордан Салливан (англ. Jordan Sullivan) — бывшая жена доктора Кокса, член совета директоров и сотрудник администрации клиники (1-8 сезоны, 88 серий);
* Джонни Кастл — Доктор Даг Мёрфи (англ. Dr. Doug Murphy) — патологоанатом (1-8 сезоны, 49 серий);
* Трэвис Шульдт — Кит Дудмайстер (англ. Keith Dudemeister) — интерн, бывший жених Элиот (5-8 сезоны, 39 серий);
* Чарльз Чунь — Доктор Вэнь (англ. Dr. Wen) — хирург (1-8 сезоны, 21 серия);
* Михаэль Хоберт — Лонни — сотрудник клиники (1-8 сезоны, 19 серий);
* Элизабет Бэнкс — Доктор Ким Бриггс (англ. Dr. Kim Briggs) — уролог, мать ребенка Джей Ди (5-8 сезон, 15 серий);
* Скотт Фолей — Шон Келли (англ. Sean Kelly — возлюбленный Эллиот, а позже — Ким Бриггс (1, 3 и 8 сезоны, 12 серий);
* Тара Рейд — Дэнни Салливан (англ. Danni Sullivan — сестра Джордан (3-4 сезоны, 11 серий);
* Хизер Грэм — Доктор Молли Клок (англ. Dr. Molly Clock) — психиатр (4 сезон, 9 серий);